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Namipo 转染试剂
发布日期:2017-09-02 12:38:35 浏?#26469;?#25968; :
导读
NamipoTM 转染试剂Nanoscale micro poly Transfection Reagent方便 无毒 高效产品简介NamipoTM是一种高分子纳米微聚球结构转染试剂

NamipoTM 转染试剂
Nanoscale micro poly  Transfection  Reagent
 方便   无毒   高效
 

产品简介

NamipoTM是一种高分子纳米微聚球结构转染试剂,具有生物相容性,可生物?#21040;狻?#29305;别适用于RNAi的体外转染,?#37096;?#20197;转染高纯度的水溶质粒。Namipo转染时不需要无血清培养,抗生素无影响,不需要与培养基共同孵育,不需要换?#28023;?#19988;具备核酸缓释和保护的功能。


产品优势

效率高一点

Namipo相对于传统的脂质体试剂,表现出更好的转染效率,克服了原代细胞的RNAi转染和部分原代细胞的质粒转染。
  \       \
        siRNA转染原代神经元                                                               质粒转染原代?#19978;?#32500;

毒性小一点

转染无需换?#28023;?#30456;对于传统质粒体,转染后24h细胞密度至少高出20%。使用Namipo转染RNAi可获?#37238;?#39640;的干扰效率。
\       \
      SiRNA转染RAW264.7细胞状态                                       电镜下的Namipo
 


价格低一点

一样的使用比例下,进口试剂是我们价格的一到三倍,超高的性价比也是您选择Namipo一个合适理由。

Catalog #

TSBBR001

TSBBR003

TSBBR0015

TSBBR0075

Size

0.3 mL

1mL

1.5mL

5X1.5mL

单价 (CNY)

800

2200

3200

15000


使用方法

 

  • siRNA 转染(RNAi)

RNAi Transfection
 

A.将siRNA溶于RNase-Free water ,震荡混匀配置成20μM母?#28023;?#37197;置方法见附表一。

B.使?#20204;?#35831;用振荡器轻微震荡5s混匀,如有少量沉淀属于正常现象,本品?#37322;?#26126;或乳白色均不影响产品品质。

C.根据使用量(参考附表三)将Namipo(μl)与siRNA母?#28023;?mu;l) 1:1混合,移液器轻轻?#33633;?0?#25105;?#19978;充分混匀,室温或4℃孵育10?#31181;印?/span>

D.按照使用量将Namipo-SiRNA复合物加入培养基,?#33633;?-10?#20301;?#21248;,或8字摇匀。转染前后培养基无需特殊处理,24小时内建议不要换液。

E.转染后检测,若所转染的siRNA带有荧光标记,可在转染12小时后直接观察荧光,观察转染效率。若siRNA不带荧光,转染24-48小时可通过qPCR检测靶基因的表达水平,由于siRNA本身就存在效?#39280;?#39064;,为了方便判断转染是否成功,最好设置一组GAPDH的siRNA阳性对照(NamipoTM  转染试剂试剂盒会赠送0.5nmol Fam-NC绿色荧光标记的siRNA对照)。

  • 质粒转染 

Plasmid DNA Transfection
 

  • 质粒制备必须去内毒素,不可用TE等buffer溶解,否则会?#29616;?#24433;响转染效率。
  • Namipo转染试剂使?#20204;?#35831;用振荡器轻微震荡5s混匀,如有少量沉淀属于正常现象,产品?#37322;?#26126;或乳白色均不影响产品品质。
  • 根据使用量(参考附表三)将Namipo转染试剂(μl)与无内毒素水溶质粒(μg) 1:1混合,移液器轻轻?#33633;?-10次充分混匀,室温或4℃孵育10?#31181;印?/span>
  • 按照使用量将Namipo-Plasmid DNA复合物加入培养基,轻轻?#33633;?#25110;8字摇匀。培养基无需特殊处理,24小时内建议不要换液。
  • 转染后检测,若所转染的质粒带有荧光蛋白,可在转染后24-48小时后观察荧光,观察转染效率。若质粒不带荧光,转染后24-48小时可通过qPCR或wb等方法检测转染基因的表达水平,(NamipoTM  转染试剂试剂盒会赠送10ug 无内毒素的copGFP荧光蛋白质粒)。

 
 
备注:
附表一 配置20μM溶液用量表


摩尔量 nmol 0.5 1 2 5 10 20
溶解量(μL) 25 50 100 250 500 1000
备注;siRNA合成后一般为干粉,根据提供的nmol数参照表格配置,过程中需要 RNase-Free环境。
附表二 各种浓度siRNA用量表
?#35013;?/strong> 100nM 50nM 30nM 20nM 10nM 每?#23383;?#24635;体积
96-well 0.5μL 0.25μL 0.15μL 0.1μL 0.05μL 100μL
24-well 2.5μL 1.25μL 0.75μL 0.5μL 0.25μL 500μL
12-well 5μL 2.5μL 1.5μL 1μL 0.5μL 1000μL
6-well 10μL 5μL 3μL 2μL 1μL 2000μL
 

备注;体积为20μM母液使用量
附表三 转染体积参考表


培养规格
皿/板
表面积
(cm2)
培养液
(μL)
D N A
(μg)
Namipo
(μL)
R N A i
(μL)
Namipo
(μL)
种板密度*(个/孔)
96 well 0.3 100μL 0.3μg 0.3μL 0.3μL 0.3μL 0.5-4 *104
24 well 2 500μL 1.5μg 1.5μL 1.5μL 1.5μL 0.5-2*105
12 well 4 1ml 3.0μg 3.0μL 3.0μL 3.0μL 1-3*105
6  well 10 2ml 6.0μg 6.0μL 6.0μL 6.0μL 2-3*105
60  mm 20 4ml 12.0μg 12.0μL 12.0μL 12.0μL 8-10*105
备注;可根据细胞转染难易程度上下调整0.3倍的使用量。推荐的siRNA 转染浓度为60nM,即表格中数值。


效果反馈

\  
Nanop si  VB2细胞 中科?#33322;?#24247;所  
\  
Nanop Raw264.7 siRNA 交大医学院  
\  
Nanop si A549      华西客户  


文献参考


 

1.LncRNA-UCA1 exerts oncogenic functions in non-small cell lung cancer by targeting miR-193a-3p

W Nie, H Ge, X Yang, X Sun, H Huang, X Tao, W Chen… - Cancer letters, 2016 – Elsevier

2.Effects of BMAL1–SIRT1-positive cycle on estrogen synthesis in human ovarian granulosa cells: an implicative role of BMAL1 in PCOS

J Zhang, J Liu, K Zhu, Y Hong, Y Sun, X Zhao, Y Du… - Endocrine, 2016 - Springer

3. Upregulation of the Non-Coding RNA OTUB1-isoform 2 Contributes to Gastric Cancer Cell Proliferation and Invasion and Predicts Poor Gastric Cancer …

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5.TGR5 activation suppressed S1P/S1P2 signaling and resisted high glucose-induced fibrosis in glomerular mesangial cells

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6.Long non-coding RNA LOC389641 promotes progression of pancreatic ductal adenocarcinoma and increases cell invasion by regulating E-cadherin in a …

S Zheng, H Chen, Y Wang, W Gao, Z Fu, Q Zhou… - Cancer letters, 2016 - Elsevier

7.Cyclin Y regulates the proliferation, migration, and invasion of ovarian cancer cells via Wnt signaling pathway

H Liu, H Shi, Q Fan, X Sun - Tumor Biology, 2016 - Springer

8.Dynamic quantitative proteomics characterization of TNF-α-induced necroptosis

Y Wang, ZH Huang, YJ Li, GW He, RY Yu, J Yang… - Apoptosis, 2016 - Springer

9.Inhibition of cyclooxygenase-2 alleviates liver cirrhosis via improvement of the dysfunctional gut-liver axis in rats

JH Gao, SL Wen, H Tong, CH Wang… - American Journal of …, 2016 - Am Physiological Soc
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11. CXCL12/CXCR4 Axis Regulates Aggrecanase Activation and Cartilage Degradation in a Post-Traumatic Osteoarthritis Rat Model

W Lu, J Shi, J Zhang, Z Lv, F Guo, H Huang… - International Journal of …, 2016 - mdpi.com
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